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根据分光光度计定值系统（以下简称“定值系统”）的原理，本文探讨了定值系统的标定方法。 通过对波长指示误差、波长重复性、测量线性度、重复性和稳定性的测量，保证其相关产品测量结果的准确性和一致性，为评级系统的测量性能评价提供理论支持。

定值系统的校准主要涉及三个方面：测量标准的选择、测量时的环境温度和校准方法。

1、测量标准的选择

根据定值体系的构成和应用，分别选择测量标准。

1、选用光纤光谱仪作为评定定值系统波长指示误差和波长重复性的标准。 光纤光谱仪波长的最大允许误差为±1.0nm，并配有专用光源接收装置。

2、选择标准物质作为评价量值体系线性度、重复性和稳定性的测量标准。 标准物质的性质和取值信息见表1。

表1 标准物质特征值

3、其他设备：A级容量瓶、A级刻度移液管等。

2、环境条件

1、环境温度：15℃～35℃。

2、相对湿度：≤75%。

三、标定方法

1、用光纤光谱仪测量定值系统的波长指示误差和波长重复性

(1)波长指示错误

将光纤光谱仪专用光源接收装置置于比色光路中，选择测量项目，测量该测量项目对应的固体发光器件的波长，重复测量3次，取算术平均值3个测量值的取值，按公式（1）计算波长示值误差。

式中：Δλ——波长示值误差，nm； λ——3次测量的算术平均值，nm。 ——固态发光器件的标称波长值光纤光谱仪波长校准方法，nm；

(2) 波长重复性

取三个测量值的最大值与最小值之差作为波长重复性，按公式（2）计算。

δλ=λmax-λmin (2)

式中：δλ——波长重复性，nm； λmax——三个被测波长的最大值，nm； λmin——三个被测波长的最小值，nm。

2、采用重量-体积法配制重铬酸钾、硫酸铜和氯化钴三个系列的标准溶液，用分光光度滤光片测试装置测定配制溶液的吸光度值，吸光度分别为0和1 .、2、3、4种5种不同浓度的线性标准溶液，实现定值系统线性度、重复性和稳定性的测量。

(1) 测量线性度

根据不同项目参数的波长，选择相应的标准溶液，如表2所示。

① 重铬酸钾标准溶液的配制

配制一定量的0.05mol/L H2SO4溶液备用，取重铬酸钾标准物质，用0.05mol/L H2SO4溶液稀释，配制浓度为1.5 g/L（以Cr计）的重铬酸钾溶液，然后按表2浓度稀释配制，待系列溶液稳定。

表2 不同波长对应的标准溶液及质量浓度

②氯化钴标准溶液的配制

配制一定量的0.1mol/L HCl溶液备用，称取氯化钴标准物质，用0.1mol/L HCl溶液稀释，配制浓度为40g/L（以Co计）的氯化钴溶液，然后按表2的浓度稀释配制，直至系列溶液稳定。

③ 硫酸铜标准溶液的配制

配制一定量的0.05mol/L H2SO4溶液备用，取硫酸铜标准品，用0.05mol/L H2SO4溶液稀释，配制成浓度为0.15g/mL（以Cu计）的硫酸铜溶液，然后按表2稀释配制培养基浓度，直至系列溶液稳定。 由于硫酸铜在常温常压下的溶解度为20.7克，因此本文中硫酸铜溶液最大浓度的吸光度值约为2。

④ 定值系统的吸光度测量

在相应的波长条件下，选择相应系列的标准溶液，以蒸馏水为参比溶液，用4种不同质量浓度的标准溶液进行3次连续测定，计算3次测定的平均吸光度。 对梯度标准溶液的质量浓度和吸光度测量平均值进行处理，根据线性回归法得到工作曲线的线性相关系数，如图1～图3所示。

图1 重铬酸钾溶液在412nm处的测量线性度

图2 氯化钴溶液在520nm处的测量线性度

图3 硫酸铜溶液在630nm处的测量线性度

(2) 重复性

对于不同的测量参数，根据表2中的测量波长选择不同的标准溶液进行测量。一般选择中间的一个浓度点，重复测量7次，记录每次的吸光度值，计算仪器的重复性根据公式（3）。

其中：δA——仪器重复性，%； Ai——第 i 次测定值，A；——7 次测定的吸光度平均值，A。

(3) 稳定性

在避光条件下，选择不同的波长，以蒸馏水为空白，记录稳定后吸光度的初始指示值T0光纤光谱仪波长校准方法，连续测量30分钟，每5分钟测量一次，记录指示值Ti，按式(4)中，取绝对值的最大值作为稳定性。

δT=|Ti-T0|max (4)

式中：δT——探测器的稳定性，A； T0——初始吸光度示值，A； Ti——每5分钟吸光度指示值，A。

4。结论

阐述了光谱光度值系统的标定方法。 经验证，该方法科学合理，可操作性强，能够客观评价光谱光度值系统的测量性能。 为分光光度值体系在多参数食品安全检测、水质快速检测、农药残留检测等快速检测仪器领域的应用提供了理论支持和技术支持。 重要参考。

项目支持：2021年市场监管技术保障项目“分光光度法多参数食品现场快速检测仪光度追溯技术研究”（项目编号：2021YJ018）